Monitoraggio batterico lungo il tragitto transmucoso della vite di guarigione in assenza di carico funzionale in implantologia

Risultati: Questa ricerca è servita a documentare come il profilo batterico di tutti i campioni in esame si sia mantenuto normale, con netta prevalenza di cocchi, in corrispondenza dell’interfaccia tra il profilo del colletto implantare ed il margine crestale osseo-alveolare, durante i quattro mesi precedenti il carico funzionale protesico. La presenza di un profilo batterico potenzialmente patogeno si è sviluppata esclusivamente sulla superficie del tragitto transmucoso perimplantare.La placca è un accumulo fisiologico di sostanza mista organica ed inorganica a significativo contenuto microbico, in particolare batterico che, oltre ad aderire alla superficie dei denti, può attecchire tenacemente sulle strutture implantoprotesiche (1, 2, 3).È stata delineata da precedenti studi la similarità nella composizione della placca dentale e di quella ritrovata a livello dell’abutment implantare. Questa consiste soprattutto in cocchi Gram+ aerobi e batteri non mobili (4, 5, 6).Nel corso di esperimenti sui cani, Berglundh ed Ericsson (7, 8) hanno rilevato che la quantità di placca formata nelle aree dentali e in quelle implantari è simile, così come la composizione. Gli impianti e i denti circondati da tessuti molli sani si associano costantemente ad una placca caratterizzata da quantità prevalenti di cocchi e bacilli Gram+, mentre i siti che evidenziano malattia parodontale e perimplantare diffusa contengono biopellicole con notevole quantità di bastoncelli, fusiformi e spiraliformi, nettamente prevalenti rispetto alla forme coccoidi ed in più chiaramente mobili (9, 10).Questi dati non fanno che confermare i risultati di Listgarten, secondo il quale la percentuale di cocchi ritrovata in zona implantare è pari al 71,3% del totale, mentre le altre morfologie batteriche rappresentano la netta minoranza, soprattutto quelle mobili (0,4%). Questi dati subiscono variazioni significative nei siti che evidenziano infiammazione parodontale e perimplantare con valori percentuali di cocchi nettamente diminuiti.L’obiettivo della ricerca è di valutare il profilo batterico dal punto di vista morfologico, in valori percentuali tra le varie forme batteriche presenti lungo il tragitto transmucoso della vite di guarigione posizionata dopo inserimento di fixture a due pezzi durante il periodo osteointegrativo, in assenza di carico, della durata di quattro mesi (fase di precarico).Nello specifico la ricerca vuole verificare le differenze a livello di composizione batterica della placca accumulata lungo il cercine mucoso attorno alla vite di guarigione in titanio, prima dell’inserimento dell’abutment definitivo e dell’applicazione del carico funzionale (fig. 1).

MATERIALI E METODI

Il posizionamento degli impianti è stato eseguito con un unico protocollo generale secondo tecnica flap-less per limitare variabili di contaminazione batterica del sito chirurgico. L’apertura della mucosa aderente nei siti edentuli è avvenuta mediante l’uso di mucotomo (bisturi circolare) del diametro di 4,1 mm, utilizzato per creare un’incisione completa del lembo della mucosa. È stata posizionata per tutti gli 80 impianti la medesima vite di guarigione con diametro di 5 mm ed altezza di 4 mm.
Ogni sito implantare è stato seguito a partire dal primo mese successivo al posizionamento dell’ impianto, per quattro mesi, corrispondenti al periodo della cosiddetta osteointegrazione, in totale condizione di passività funzionale e biomeccanica.
È stato eseguito, con cadenza mensile, il prelievo della placca batterica accumulata sul campione di 80 impianti per un totale di 640 prelievi nelle due sedi stabilite come oggetto di studio:
lungo il tragitto transmucoso della vite di guarigione;
più in profondità: in corrispondenza dell’interfaccia tra profilo del colletto implantare ed il margine crestale osseo-alveolare.
Per ogni prelievo è stata eseguita l’analisi in termini di profilo batterico, in vivo, secondo morfologia, mediante una tecnica ormai collaudata da oltre vent’anni da parte del nostro gruppo di studio, seguendo i concetti di Listgarten secondo cui un profilo batterico composto prevalentemente da cocchi (70%) è da ritenersi fisiologico e saprofitico a differenza di una prevalente percentuale delle altre morfologie batteriche (bastoncelli, filamentosi e spiraliformi) dal carattere invece patologico (10, 11).
I campioni sono stati siglati come segue:
TTM: campione prelevato dal tragitto transmucoso;
IMC: campione prelevato dall’interfaccia del margine crestale.
La prima fase di prelievo è stata eseguita mediante puntale sterile nell’ambito del tragitto transmucoso (TTM), mantenendo la vite di guarigione in situ con la presenza del suo film batterico (placca) per non variare le condizioni microbiotiche tra i vari livelli della nicchia di prelievo (fig. 2).

La seconda fase di prelievo (IMC) è stata eseguita dopo rimozione della vite di guarigione con l’accortezza di evitare la contaminazione dello strumento sterile di prelievo lungo il tragitto transmucoso ricco di placca (figg. 3, 4, 5). La vite di guarigione è stata poi riposizionata per mantenere le medesime condizioni ambientali nei tre successivi prelievi a cadenza mensile.

Le viti di guarigione rimosse hanno costantemente evidenziato su tutta la loro superficie una notevole componente di placca batterica (fig. 6).

Massiccio è stato il riscontro di placca anche all’interno della fixture, nonostante la presenza della vite di guarigione (fig. 3).
La metodica del conteggio morfologico batterico si è svolta mediante microscopia a contrasto di fase su campione in vivo (fig. 7).

Il materiale prelevato dai siti da analizzare (TTM e IMC), mediante puntale sterile, è stato diluito in soluzione fisiologica all’1% di gelatina liofilizzata.
Con una micropipetta a volume variabile, si sono prelevati dal contenitore 1.000 microlitri di soluzione, disciolti nella provetta madre (PM).
La PM è stata dinamizzata mediante agitatore (mod. AMR 2T), in modo da rendere omogenea la distribuzione del campione nella provetta stessa. Si è lasciato riposare il preparato per tre minuti.
Con la micropipetta dotata di nuovo puntale sterile si sono prelevati 100 microlitri di campione disciolto poi trasferiti in una provetta figlia (PF) contenente 900 microlitri di soluzione fisiologica. In questo modo si è ottenuta una diluizione di 1:10. Questa provetta è stata dinamizzata analogamente alla PM in modo da rendere omogenea la dispersione del contenuto batterico e si è lasciata riposare per tre minuti.
Si sono prelevati poi 100 microlitri di campione diluito e si sono depositati sulla superficie della camera di Burker, coprendo il campione mediante vetrino coprioggetto.
Posizionato il vetrino sullo stativo del microscopio a contrasto di fase, è stata eseguita la lettura mediante obiettivo 40x, effettuata su ogni unità di superficie (1/25 mmq) procedendo convenzionalmente dall’alto verso il basso e da sinistra verso destra, diagonalmente. Sono stati inclusi nel conteggio anche i batteri presenti sui lati contigui basso-destro del reticolo.
I conteggi delle morfologie batteriche sono stati riportati su apposita tabella.

RISULTATI

I risultati sono riassunti nella tabella 1.
Dai dati rilevati si evince una significativa differenziazione evolutiva in termini di percentuale di cocchi nei prelievi osservati dai siti TTM rispetto ai siti IMC, lungo il periodo di monitoraggio dei quattro mesi.
La riduzione progressiva dei cocchi a livello del TTM a favore delle altre morfologie batteriche indica una facile colonizzazione della nicchia microbiotica da parte della placca batterica. Il rilievo microbico a livello di IMC rivela che la presenza di cocchi rimane praticamente costante e nettamente prevalente rispetto alle altre morfologie batteriche, a significare condizioni eco-microbiotiche globalmente non favorevoli allo stabilizzarsi di un profilo ricco di bastoncelli, filamentosi e spiraliformi.
Analisi statistica
Trattandosi di valori percentuali, l’analisi statistica è stata condotta con metodi non parametrici (12, 13). Per valutare la significatività statistica delle differenze riscontrate tra i due prelievi contemporanei (TTM e IMC) è stato impiegato il test U di Mann-Whitney (14) (figg. 8-11).

DISCUSSIONE

La ricerca vuole evidenziare come nel cercine mucoimplantare a livello del margine crestale, in assenza del carico occlusale ed in particolare di fattori di pressione ambientale stressogeni (carico occlusale disfunzionale), permanga una spontanea stabilizzazione batterica molto regolare (16, 17, 18). La presenza ordinata e relativamente ripetitiva di cocchi Gram+ ostacola lo sviluppo di condizioni microbiotiche perimplantari patogene atte a favorire condizioni di invasione batterica dei tessuti profondi: infezione e quindi perimplantite (19, 20, 21).
I rapporti di ecosistema, tra organismo ospite e fronte batterico, in termini di componente ecologica integrata, vengono così mantenuti (Microbioma) (22, 23).
L’assenza di sollecitazioni di natura biomeccanica (carico occluso-statico-dinamico) permette il mantenimento di un equilibrio tra il sistema vite implantare-osso-mucosa da una parte e il fronte batterico dall’altra.
La componente batterica mantiene costante valenza saprofitico-commensale, non invasivo-aggressiva, indipendentemente dalle morfologie che progressivamente si sviluppano lungo il tragitto transmucoso (TTM) e l’interfaccia tra impianto e margine crestale osseo (IMC).

CONCLUSIONI

Questo studio è servito a dimostrare che la sola pur massiccia presenza di batteri in un contesto biologico multifattoriale, in assenza di carico, non risulta sufficiente a produrre effetti destabilizzanti sull’equilibrio tra ospite e fronte batterico (24-30).
Il carico disfunzionale (trauma occlusale)potrebbe risultare quale fattore predisponente alla trasformazione del profilo batterico da saprofitico a patogeno (16, 17). ●

federico.meynardi@istitutomagnus.it